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上機生化

一氧化氮 NO

 服務介紹:

一氧化氮(Nitric Oxide,NO)廣泛分布于生物體內神經、循環(huán)、呼吸、消化、泌尿生殖等系統(tǒng)中,特別是神經組織中較豐富。它作為細胞間及細胞內的信息物質,發(fā)揮信號傳遞的作用,是一種新型的生物信使分子,在機體的生理、病理過程中起著重要的作用。


實驗流程具體步驟以說明書為準):

1. 樣品準備
血清、血漿、透明液體狀樣本、動植物組織等

2. 檢測前準備

處理樣本,配制試劑

3. 檢測步驟

 加樣-加試劑-顯色反應后酶標儀讀數

4. 實驗結果

樣本OD值代入公式計算出結果,以EXCEL形式發(fā)出


  送樣運輸要求:

1、動植物組織樣本(干冰運輸)

①動物處死后5min內取樣,全程冰上操作,先取易降解的組織,如胰腺、腸、胃等,再取其它組織,組織塊至少取50mg以上(黃豆大?。?。組織取好后用預冷的PBS輕輕漂洗掉樣本表面的血污,例如心、肝、脾、腎等血污較多的組織,可用預冷PBS清洗多次,直至血污清洗干凈,用濾紙吸干組織表面液體,立即放入EP管或凍存管中-80℃保存。

②腸,胃,血管,食管,子宮等標本,取材后立即把組織切開用預冷PBS清洗多次,去除內容物,用濾紙吸干組織表面液體,立即放入EP管或凍存管中-80℃保存。

③剛孵化的斑馬魚離心后至少提供黃豆大小的數量。

④視網膜需單獨剝離,小鼠至少需要4個視網膜合并,大鼠至少需要2個視網膜合并。

⑤皮膚樣本需去凈毛發(fā)。

2、血清樣本(干冰運輸)

全血標本加到促凝管(黃色管蓋,QX0028)或者無菌無酶的EP管(EP-150X-J)中室溫靜置2小時后于2-8℃ 3000rpm/min離心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

3、血漿樣本(干冰運輸)

全血樣本置于肝素抗凝管內(綠色管蓋,QX0012),采血量為抗凝管標注體積的80%-100%,血量勿超過抗凝管標注體積否則抗凝效果不佳,血量不少于80%標注體積,否則樣本會被抗凝劑稀釋。輕輕顛倒混勻,30分鐘內于2-8℃ 3000rpm/min離心15min,取上清放于-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

4、細胞樣本(細胞量至少107,細胞沉淀黃豆大小,干冰運輸)

貼壁細胞:①培養(yǎng)好的細胞棄培養(yǎng)基,加入PBS,用細胞刮沿一個方向輕輕刮下細胞,切記不要反復刮,避免細胞刮破。②細胞液收集至離心管內,4℃低速離心(不超過3000rpm)5min,去上清,收集細胞沉淀,細胞沉淀要有黃豆大小。

懸浮細胞:①將細胞及培養(yǎng)基一起吸入離心管中,4℃低速離心(不超過3000rpm)5 min,去上清,收集細胞沉淀。②加入1mL PBS溶液重懸細胞,將細胞轉移到1.5mL離心管中,4℃低速離心(不超過3000rpm)5min,去上清,收集細胞沉淀,細胞沉淀要有黃豆大小。

細胞上清:取細胞培養(yǎng)基于2-8℃,3000rpm/min離心15min取上清,于-20℃或-80℃保存,避免反復凍融。

備注:不要寄送培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶,運輸過程中細胞容易脫落且造成細胞活力下降,培養(yǎng)板有漏液風險,造成樣本污染。

 


 

僅供科研用途,不可用于臨床診斷!