服務(wù)介紹：

　　蛋白質(zhì)組學(xué)(Proteomics)指的是大規(guī)模、高通量地研究一個細胞、組織或物種中表達的全套蛋白質(zhì)的學(xué)科。近十年來，質(zhì)譜技術(shù)的飛速發(fā)展大大推動了的蛋白質(zhì)組學(xué)的進步，基于質(zhì)譜的蛋白質(zhì)組學(xué)已經(jīng)成為蛋白質(zhì)研究領(lǐng)域必不可少的技術(shù)手段。通過蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)可以對生物樣本中的蛋白質(zhì)、翻譯后修飾位點(如磷酸化)進行大規(guī)模地鑒定或定量，進而從高通量的數(shù)據(jù)分析中挖掘有價值的信息和規(guī)律，為功能機制的探究提供線索和基礎(chǔ)。2003年，人類基因組計劃(HGP)完成精細圖的繪制后，同年，人類蛋白質(zhì)組學(xué)計劃(HPP)隨即開展起來，反映了科研領(lǐng)域?qū)Φ鞍踪|(zhì)組學(xué)的重視。經(jīng)過十年時間，多家單位的共同努力下，人類蛋白質(zhì)組草圖也于2014年在Nature雜志公布了。

　　泛素是一類在真核細胞中普遍存在的由76個氨基酸組成的高度保守小分子。泛素-蛋白酶體系統(tǒng)是細胞內(nèi)絕大多數(shù)蛋白質(zhì)降解的主要方式之一泛素-蛋白酶體系統(tǒng)(Ubiquitin-proteasome system, UPS)介導(dǎo)了真核生物80%~85%的蛋白質(zhì)降解，該蛋白質(zhì)降解途徑具有依賴ATP、高效、高度選擇性的特點。除參與蛋白質(zhì)降解之外，泛素化修飾還可以直接影響蛋白質(zhì)的活性和定位。由于泛素化修飾底物蛋白在細胞中的廣泛存在，泛素化修飾可以調(diào)控包括細胞周期、細胞凋亡、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、DNA損傷修復(fù)以及免疫應(yīng)答等在內(nèi)的多種細胞活動。 利用對泛素化賴氨酸(K-GG)具有高親和力的基序抗體，特異性富集復(fù)雜樣本中的泛素化肽段，結(jié)合LC-MS/MS蛋白質(zhì)定量方法，實現(xiàn)大規(guī)模泛素化蛋白質(zhì)定性定量分析。

　　實驗結(jié)果展示：

　　1. 泛素化蛋白組一般思路

　　2. 泛素化激活調(diào)節(jié)通路

　　3. 樣品中蛋白鑒定結(jié)果概覽

　　實驗流程：

　　蛋白提取—蛋白酶解—泛素化肽段富集—高分辨質(zhì)譜檢測采集數(shù)據(jù)—數(shù)據(jù)庫檢索—數(shù)據(jù)分析-差異蛋白篩選-生物信息分析

　　送樣運輸要求：

　　1、蛋白樣本

　?、俚鞍琢看笥?00ug，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、诮ㄗh測定蛋白濃度后，液氮速凍，避免蛋白降解，另外需要告知蛋白溶液的緩沖液成分和濃度，方便實驗室收到后進行后續(xù)處理。

　?、勰z條、膠點樣本不建議進行定量蛋白質(zhì)組學(xué)。

　　2、細胞樣本

　　①細胞量1x10⁷個，收集細胞沉淀，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。

　　3、血清樣本

　?、贅颖玖?00uL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。

　　4、血漿樣本

　?、贅颖玖?00uL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、跇颖緫?yīng)盡量避免溶血。

　　5、尿液樣本

　?、贅颖玖?mL，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、跇悠窇?yīng)盡量避免帶入糞便殘渣。

　　6、動物組織樣本

　　①樣本量300mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面血液，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結(jié)冰。

　?、酃潭ㄒ航葸^的樣本無法進行檢測。

　　7、植物組織樣本

　?、贅颖玖?00mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液沖洗表面泥沙，并用濾紙吸干多余水分，避免凍存時結(jié)冰。

　　③固定液浸泡過的樣本無法進行檢測。

　　8、微生物樣本

　?、贅颖玖扛芍?00mg，-80℃保存，純干冰運輸，避免反復(fù)凍融。

　?、谑占瘯r，用預(yù)冷PBS緩沖液清洗三次，去除培養(yǎng)基成分，然后離心去除上清保存。

僅供科研用途，不可用于臨床診斷！