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保存運輸方法
保存運輸方法

保存運輸方法

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原位雜交樣本準(zhǔn)備方法及要求

樣本類型

取樣及運輸要求

組織冰凍切片1.組織取出后,切取需要部位,厚度不要太厚,2mm左右,用PBS漂洗干凈,干冰運輸或立即置于固定液中,室溫固定12h以上 (根據(jù)組織大小)。1.新鮮組織干冰運輸;
2.標(biāo)本放原位雜交固定液中,常溫運輸;
3.冰凍切片-20℃運輸;
2.固定液有原位雜交固定液(動物)、原位雜交固定液(植物)。
3.植物組織固定時需常溫抽真空30min,倒掉固定液,用純水或PBS清洗兩次后,放入15%蔗糖溶液中4℃脫水8h,接著換30% 蔗糖溶液4℃過夜。
4.冰切時佩戴手套,冰凍切片放-20℃或-80℃保存?zhèn)溆谩?/td>
組織石蠟切片1.組織取出后,切取需要部位,厚度不要太厚,2mm左右,用 PBS漂洗干凈后立即固定。1.標(biāo)本放原位雜交固定液中,常溫運輸;
 2.石蠟切片常溫運輸
2.動物組織用原位雜交固定液(動物),植物組織用原位雜交固定液 (植物)或原位雜交固定液(較嫩植物)。
3.植物組織固定時需常溫抽真空30min,固定12h以上。
4.固定完成后脫水、包埋、切片(梯度酒精配制需用DEPC水,石 蠟常規(guī)保存?zhèn)溆?。


注:1.以上所有樣本必須盡量新鮮,固定液或懸浮液都不得冷凍結(jié)冰。

2.DEPC 水配制:純水中加入0.1%DEPC 原液震蕩攪拌2h,靜置過夜后高壓滅菌30min 以上,或直接購買。