組化熒光樣本準(zhǔn)備方法及要求
作者:admin2025-03-14 08:58
熱度:326
樣本類型 | 樣品要求 | 保存運輸條件 |
石蠟切片 | 切片放置時間不能超過半年 | 常溫 |
冰凍切片 | 1.厚度不要超過10um。 | -20℃ |
2.提供的冰凍切片放置時間不能超過三個月 |
細(xì)胞爬片 | 1.細(xì)胞密度合適(最好是105),狀態(tài)要好,最 好細(xì)胞覆蓋率90%最好(特殊細(xì)胞除外) 2.不要把細(xì)胞直接爬在底板上,建議爬在玻片 上,最好選用6孔板 | 4℃,固定好細(xì)胞的細(xì)胞爬片轉(zhuǎn)換成PBS運輸 |
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細(xì)胞懸液 | 細(xì)胞固定好后離心取沉淀,加入PBS重懸,離 心后的細(xì)胞沉淀至少肉眼可見綠豆大小。 | 4℃保存運輸 |
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做活細(xì)胞的特殊染色: | 1.新鮮或冷凍組織冰凍切片或活細(xì)胞 | -20℃ |
1、ROS(活性氧) |
2.MTR(線粒體) | 2.冰凍切片-20℃保存。如果要做活細(xì)胞染色,則提供瓶裝細(xì)胞,給我們公司細(xì)胞房培養(yǎng),制成爬片。 |
3.JC-1(線粒體膜電位) |
4.FJB(染壞死神經(jīng)元) | 石蠟切片或冰切切片 | 石蠟切片常溫保存。冰凍切片-20℃保存 |
5.WGA(染心肌細(xì)胞膜) |
6.硫磺素(染淀粉樣蛋白) | 按照冰凍切片和細(xì)胞爬片的條件即可 |
7.BODIPY(脂滴熒光染色) | 冰凍切片和細(xì)胞爬片都可以做。 |
8.鬼筆環(huán)肽(細(xì)胞骨架染色) | 只能做細(xì)胞爬片 | 細(xì)胞PFA固定15min,后用無菌PBS洗滌后浸泡,4℃冰袋保存運輸?shù)綄嶒炇?/td> |
9.Hochest(細(xì)胞核染色) | 石蠟切片,冰凍切片,細(xì)胞爬片,都能做。 |
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10.EDU(細(xì)胞增殖檢測) |
11.BRDU(細(xì)胞增殖檢測) |