一、原理

骨質(zhì)疏松癥是一種以骨密度降低為特征的系統(tǒng)性骨骼疾病。骨穩(wěn)態(tài)由吸收骨骼的破骨細(xì)胞和形成骨骼的成骨細(xì)胞維持。這種體內(nèi)平衡可能會因各種原因而失衡，其中絕經(jīng)引起的荷爾蒙變化是破骨細(xì)胞活性異常的原因。卵巢切除（OVX）小鼠模型是國際公認(rèn)的模擬絕經(jīng)后骨質(zhì)疏松的經(jīng)典動物模型，具有高度的病理相似性和可重復(fù)性，為藥物研發(fā)及機(jī)制研究提供理想平臺。

二、OVX模型構(gòu)建

(1) 將11 周齡的 C57BL/6J 小鼠麻醉，通過足趾夾捏反射消失確認(rèn)麻醉。

(2) 將大鼠腰背部剃毛，碘伏消毒。

(3) 在脊柱兩側(cè)1cm處各作一個縱向切口（長度0.5cm），鈍性分離肌肉層，找到包裹卵巢的脂肪墊。

(4) 結(jié)扎輸卵管-子宮連接處，完整切除卵巢。

(5) 逐層縫合肌肉與皮膚，碘伏消毒，單籠常規(guī)飼喂，術(shù)后6-7周成模。

三、模型評價及后續(xù)檢測

1. 骨結(jié)構(gòu)觀察

通過Micro-CT（計(jì)算機(jī)斷層掃描）觀察骨結(jié)構(gòu)，可選擇性呈現(xiàn)骨密度（BMD）、骨體積/總體積（ BV/TV）、骨表面積/骨體積（BS/BV）、骨表面積/總體積 （BS/TV），骨小梁數(shù)目(Tb.N)、以及骨小梁厚度（Tb.Th）、骨小梁間隔（Tb.sp)等。

（圖片來源于文獻(xiàn) PMID：34184079，僅做結(jié)果解圖示例。）

2. HE

H&E 染色結(jié)果顯示，假手術(shù)組骨小梁（BM）應(yīng)呈現(xiàn)正常網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，排列緊密且連續(xù)，厚度均勻。OVX 組骨小梁（BM）：稀疏、斷裂，網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)破壞，厚度變薄，間隙增大。

3. TRAcP

骨切片的TRAcP活性染色（紅色區(qū)域標(biāo)識破骨細(xì)胞，TRAP為破骨細(xì)胞標(biāo)志酶，特異的分布于破骨細(xì)胞中）表明，與假手術(shù)組小鼠相比，OVX組小鼠骨組織中的破骨細(xì)胞數(shù)量增多。

4. IHC（免疫組化）

骨吸收標(biāo)志物 MMP9 和 NFATc1 的 IHC 分析顯示，與假手術(shù)組相比，OVX 組的 MMP9 和 NFATc1 陽性細(xì)胞數(shù)量顯著增加。（ MMP9、NFATc1是介導(dǎo)破骨細(xì)胞生長中的重要開關(guān)）

參考文獻(xiàn)

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