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服務(wù)介紹:
三磷酸腺苷(adenosine 5'-triphosphate,ATP)是生物體內(nèi)能量轉(zhuǎn)換最基本的載體, 其含量的變化直接關(guān)系到各器官的能量代謝。ATP作為最重要的能量分子在細(xì)胞的各種生理、病理過程中起著重要作用。ATP水平的改變,會影響許多細(xì)胞的功能。通常細(xì)胞在凋亡、壞死或處于一些毒性狀態(tài)下,ATP水平會下降,而高葡萄糖刺激等對于一些細(xì)胞可以上調(diào)細(xì)胞內(nèi)ATP水平。通常ATP水平的下降表明線粒體的功能受損或下降,在細(xì)胞凋亡時ATP水平的下降通常和線粒體的膜電位下降同時發(fā)生狀態(tài)。
名稱 | 規(guī)格 | 價格(元) |
三磷酸腺苷ATP | 反應(yīng) | 20 |
實(shí)驗(yàn)流程(具體步驟以說明書為準(zhǔn)):
1. 樣品準(zhǔn)備
細(xì)胞、動植物組織等
2. 檢測前準(zhǔn)備
處理樣本,配制試劑
3. 檢測步驟
加樣-加試劑-顯色反應(yīng)后酶標(biāo)儀讀數(shù)
4. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
樣本測定值代入公式計算出結(jié)果,以EXCEL形式發(fā)出
送樣運(yùn)輸要求:
1、動植物組織樣本(干冰運(yùn)輸)
①動物處死后5min內(nèi)取樣,全程冰上操作,先取易降解的組織,如胰腺、腸、胃等,再取其它組織,組織塊至少取50mg以上(黃豆大?。?。組織取好后用預(yù)冷的PBS輕輕漂洗掉樣本表面的血污,例如心、肝、脾、腎等血污較多的組織,可用預(yù)冷PBS清洗多次,直至血污清洗干凈,用濾紙吸干組織表面液體,立即放入EP管或凍存管中-80℃保存。
②腸,胃,血管,食管,子宮等標(biāo)本,取材后立即把組織切開用預(yù)冷PBS清洗多次,去除內(nèi)容物,用濾紙吸干組織表面液體,立即放入EP管或凍存管中-80℃保存。
③剛孵化的斑馬魚離心后至少提供黃豆大小的數(shù)量。
④視網(wǎng)膜需單獨(dú)剝離,小鼠至少需要4個視網(wǎng)膜合并,大鼠至少需要2個視網(wǎng)膜合并。
⑤皮膚樣本需去凈毛發(fā)。
2、細(xì)胞樣本(細(xì)胞量至少107,細(xì)胞沉淀黃豆大小,干冰運(yùn)輸)
貼壁細(xì)胞:①培養(yǎng)好的細(xì)胞棄培養(yǎng)基,加入PBS,用細(xì)胞刮沿一個方向輕輕刮下細(xì)胞,切記不要反復(fù)刮,避免細(xì)胞刮破。②細(xì)胞液收集至離心管內(nèi),4℃低速離心(不超過3000rpm)5min,去上清,收集細(xì)胞沉淀,細(xì)胞沉淀要有黃豆大小。
懸浮細(xì)胞:①將細(xì)胞及培養(yǎng)基一起吸入離心管中,4℃低速離心(不超過3000rpm)5 min,去上清,收集細(xì)胞沉淀。②加入1mL PBS溶液重懸細(xì)胞,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到1.5mL離心管中,4℃低速離心(不超過3000rpm)5min,去上清,收集細(xì)胞沉淀,細(xì)胞沉淀要有黃豆大小。
備注:不要寄送培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶,運(yùn)輸過程中細(xì)胞容易脫落且造成細(xì)胞活力下降,培養(yǎng)板有漏液風(fēng)險,造成樣本污染。
僅供科研用途,不可用于臨床診斷!