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實驗技巧
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剛果紅染色

剛果紅染色是什么?

Congo Red, Amyloid fibril-binding dye(剛果紅)是一種偶氮染料。剛果紅 (CR) 結(jié)合被用作組織切片中淀粉樣蛋白存在的診斷測試。剛果紅組織化學(xué)染色可作為一種簡單的篩選工具,用于研究突變細胞中的聚集體是否具有錯誤折疊的 β 折疊片二級結(jié)構(gòu)。


實驗原理

淀粉樣蛋白對剛果紅有選擇性親和力,因此容易著染。剛果紅是一種分子為長線狀的偶氮染料,其上的氨基容易與淀粉樣蛋白的羥基結(jié)合,從而使淀粉樣物質(zhì)染成紅色。該染色法性能穩(wěn)定,是一種經(jīng)典的淀粉樣物質(zhì)染色方法。



染色應(yīng)用

淀粉樣蛋白對剛果紅有選擇性親和力,因此容易著染。剛果紅是一種分子為長線狀的偶氮染料,其上的氨基容易與淀粉樣蛋白的羥基結(jié)合,從而使淀粉樣物質(zhì)染成紅色。該染色法性能穩(wěn)定,是一種經(jīng)典的淀粉樣物質(zhì)染色方法。


實驗步驟

1、切片脫蠟至水,入剛果紅染液浸染一夜,自來水洗

2、用 0.2% 的 KOH 溶液快速分化 1s,即刻水洗終止分化,鏡檢,可反復(fù)分化水洗,至陽性斑塊呈淡粉色或橘紅

3、切片入蘇木素浸染 30s,分化返藍,自來水洗。

4、切片依次入 3 缸無水乙醇脫水,各 5min,二甲苯透明 5min,中性樹膠封片。



染色結(jié)果判讀

淀粉樣變斑塊呈淡粉色或橘紅色云朵狀或片塊狀,細胞核呈淺藍色


送樣運輸要求

1、樣本放置于10倍樣本體積的固定液中固定24h以上,常溫運輸(勿冷凍結(jié)冰)。

2、石蠟切片常溫運輸,冰凍切片-20℃運輸。



實驗例圖
053.png
腦-剛果紅染色